Les cellules souches tumorales ont des propriétés d’autorenouvellement et de prolifération. Le phénotype membranaire CD44+/CD45− a été identifié comme étant un marqueur de cellules souches tumorales dans les carcinomes bronchiques non à petites cellules (CBNPC). Les carcinomes sarcomatoïdes pulmonaires (CSP) sont un sous-type rare, agressif et chimio-résistant de CBNPC. Les objectifs de ce travail sont d’identifier une population CD44+/CD45− à partir de cultures primaires et de prélèvements humains de CS et de comparer quantitativement et qualitativement cette population à celle des CBNPC.
Sept cultures primaires issues de CSP (n=6) et de CBNPC (n=1) ainsi que 5 lignées commerciales (A549, H322, H441, H1299, H1650) étaient disponibles au laboratoire. Vingt prélèvements (plvts) tumoraux frais issus de CSP (n=4) ou de CBNPC (n=16) (tumeurs primitives pulmonaires n=14, localisations secondaires n=6) ont été recueillis. Onze plvts frais ont été mis en culture (CSP n=3 ; CBNPC n=8). La population CD44+/CD45− a été isolée sur les cultures primaires (n=10), sur les lignées commerciales (n=5) et sur 17 plvts frais (CSP n=2 ; CBNPC n=15) par cytométrie de flux (anti-CD44, anti-CD45, contrôles isotypiques, iodure de propidium). Un tri cellulaire automatique couplé à la cytométrie a été réalisé pour 13 plvts frais, 2 lignées commerciales et 4 cultures primaires suivi d’une mise en culture des cellules CD44+/CD45− pour tests de clonogénicité et de prolifération.
Parmi les 11 plvts mis en culture, 3 ont donné des cultures primaires, tous étaient issus de CSP. Parmi les plvts mis en culture et les lignées disponibles au laboratoire, les cultures primaires sarcomatoïdes (n=9) étaient plus enrichies en population CD44+/CD45− que les lignées commerciales de CBNPC (n=5) et une culture primaire issue de CBNPC (87 % [73,3–93,3] vs 22,6 % [0–91,95] vs 81 % ; p=0,031). Dans les plvts frais (n=7), le taux de cellules CD44+/CD45− était plus élevé dans les plvts tumoraux que dans les plvts normaux (6,12 % [3,00–9,84] vs 0,87 % [0,27–4,69] ; tendance). Le taux de cellules CD44+/CD45− était plus élevé dans les plvts tumoraux de CSP (n=2) que dans les plvts de CBNPC (n=5) (7,98 % [6,12 %–9,84 %] vs 0,8 % [0,15 %–10,5 %] ; tendance). Dans les lignées et les cultures primaires, la prolifération avait tendance à être plus importante dans la population CD44+/CD45− que dans la population CD44−/CD45−. La prolifération avait tendance à être plus importante dans les cultures primaires de CSP que dans les lignées commerciales. Nous poursuivons le recueil de prélèvements frais ainsi que les tests de prolifération et de clonogénicité.
Il est possible d’individualiser une population CD44+/CD45− dans les CSP. Les résultats préliminaires suggèrent que cette population a des caractéristiques de cellules souches tumorales.
Le texte complet de cet article est disponible en PDF.
© 2015
Publié par Elsevier Masson SAS.