La protéine kinase C alpha régule les canaux calciques Ca_v1 dans les lymphocytes Th2 : cible thérapeutique dans l’asthme allergique - 09/06/21

Les canaux calciques Ca_v1.2 et Ca_v1.3, sont sélectivement présents sur les lymphocytes Th2 (LTh2) murins et humains (et non sur les Th1). Ils sont essentiels in vitro pour la réponse calcique et la production des cytokines Th2 (IL-4, -5 et -13) et in vivo pour l’induction d’un asthme allergique. Nous suspectons la protéine kinase C alpha (PKCα) d’être un partenaire pour l’activation des canaux Ca_v1 dans les LTh2 et donc une nouvelle cible thérapeutique dans l’asthme allergique.

Les LTh2 sont stimulés avec le PMA (activateur des PKCs) en présence ou pas de nicardipine, un inhibiteur des canaux calciques Ca_v1. Après transfections des LTh2 avec des oligonucléotides (ODN) antisens PKCα (AS-PKCα), la sécrétion des cytokines Th2 a été quantifiée par ELISA dans les surnageants et le signal calcique est analysé au champ large après stimulation du TCR. L’effet de l’AS-PKCα a été étudié dans deux modèles d’asthme :

– Les souris BALB/c reçoivent de l’ovalbumine (OVA) en alum par voie intrapéritonéale (i.p.) puis inhalent l’OVA avec l’AS-PKCα ou un ODN contrôle ;

– Les LTh2 préalablement transfectés avec l’AS-PKCα sont injectées en i.v. à des souris Balb/c qui inhalent l’OVA.

Les lavages bronchoalvéolaires (LBA), les IgE sériques, ainsi que les lésions histologiques pulmonaires sont analysés.

Le PMA induit un signal calcique et la production des cytokines Th2 dans les LTh2, qui sont inhibés par la nicardipine. L’AS-PKCα diminue in vitro le signal calcique et la production de cytokines dans les LTh2 suite à l’engagement du TCR. In vivo, le nombre total de cellules dans le LBA, le score histologique et la concentration d’IgE sériques sont diminués dans le groupe AS-PKCα, dans le modèle d’asthme actif comme dans le modèle passif.

L’activation directe des PKCs induit la production des cytokines Th2 de façon dépendante des canaux calciques Ca_v1. La PKCα joue un rôle prépondérant dans la fonction des LTh2 et in vivo dans l’induction de l’asthme allergique. Du fait d’une large surface permettant les échanges alvéolocapillaires, le poumon est l’organe idéal pour tester le potentiel thérapeutique de ces ODN antisens PKCα inhalés dans l’inflammation de l’asthme allergique.