Étude de la physiopathologie de la fibrose pulmonaire associée au défaut autosomique dominant de PARN - 09/05/26

Les anomalies monogéniques de l’homéostasie des télomères sont les principales causes génétiques de fibrose pulmonaire. La ribonucléase spécifique de poly(A) (PARN), codée par le gène PARN , est impliquée dans l’homéostasie des télomères. Les variants hétérozygotes pathogènes de PARN sont parmi les variants pathogènes les plus fréquemment identifiés chez les patients atteints de fibrose pulmonaire familiale [1 Philippot Q, et al. Interstitial lung diseases associated with mutations of poly(A)-specific ribonuclease: a multicentre retrospective study. Respirology 2022.

Haga clic aquí para ir a la sección de Referencias] . Les mécanismes reliant les variants pathogènes de PARN à la fibrose pulmonaire sont inconnus. L’objectif de ce projet est de caractériser les mécanismes moléculaires et cellulaires à l’origine de la fibrose pulmonaire associée aux variants pathogènes hétérozygote de PARN .

L’ADN complémentaire (ADNc) correspondant à des variants de PARN a été généré, puis exprimé dans une lignée cellulaire n’exprimant pas PARN (HT1080 PARN KO) [2 Benyelles M, et al. Impaired telomere integrity and rRNA biogenesis in PARN-deficient patients and knock-out models. EMBO Mol Med.2019.

Haga clic aquí para ir a la sección de Referencias] . L’expression et la fonction de PARN ont été caractérisées dans ces cellules, ainsi que dans des fibroblastes pulmonaires primaires ( n = 2) et des cellules B-EBV ( n = 3) issus de patients atteints de fibrose pulmonaire et porteurs de variants pathogènes de PARN . Une lignée de cellules souches embryonnaires humaines a également été utilisée.

Nous avons étudié les variants p. E313*, p. Y369* et Y546Tfs*19 de PARN, identifiés chez 6 patients de notre cohorte atteints de fibrose pulmonaire. Dans les cellules HT1080 PARN KO transduites avec l’ADNc muté de PARN , PARN n’était pas détecté et la concentration de TERC, proportionnelle à l’activité de PARN, était réduite. Dans les fibroblastes pulmonaires primaires et/ou les cellules B-EBV des patients, nous avons observé une diminution de l’expression de PARN. La concentration de TERC était réduite dans les cellules B-EBV des patients. L’activité télomérase de ces cellules est en cours de caractérisation. Les fibroblastes primaires issus des patients présentaient une prolifération réduite et une production réduite de fibronectine en réponse à une stimulation par le TGF-bêta. Pour étudier l’impact du défaut de PARN sur le pneumocyte de type 2, principale cellule expriment la télomérase au niveau pulmonaire, nous avons dérivés des alvéolosphères à partir de cellules souches embryonnaires humaines dans lesquelles nous allons générer une déplétion de PARN.

Des variants pathogène de PARN , observés chez des patients atteints de fibrose pulmonaire, sont associés à une perte d’expression et de fonction de PARN dans un modèle de surexpression. Des fibroblastes pulmonaires primaires issus de ces patients présentent des anomalies phénotypiques pouvant participer à la fibrogenèse pulmonaire. Nous avons mis en place un modèle cellulaire qui nous permettra d’étudier l’impact du défaut de PARN sur le pneumocyte de type 2.